Dowód apoptozy w arytmogennej dysplazji komór komorowych cd

Szkiełka przemywano solą fizjologiczną buforowaną fosforanem, a następnie inkubowano z biotynylowanym końskim anty-IgG (Vector Laboratories, Burlingame, CA) w rozcieńczeniu 1: 200. Plamy wizualizowano za pomocą układu awidyna-alkaliczna fosfataza-substrat (Vectastain ABC Kit i Vector Red, Vector Laboratories, Burlingame, CA). Jako kontrola ujemna, seryjne skrawki barwiono bez pierwotnego przeciwciała przeciw CPP-32. Wyniki
Dowody apoptozy
Rycina 2. Rycina 2. Znakowanie końca skończonego DNA in situ za pomocą TdT i biotynylowanego dUTP. Komórki z fragmentowanym DNA wybarwiały się na brązowo, podczas gdy komórki z normalnymi jądrami zabarwiały się na niebiesko (barwienie immunoperoksydazowe przy barwieniu kontrastowym hematoksyliną). W panelu A, fragment normalnej prawej komory prawej nie pokazuje jądra apoptotycznego (x 100). Przekroje poprzeczne (panele B i C) oraz przekroje podłużne (panele D i E) mięśnia sercowego prawej komory od pacjentów z letalną arytmogenną dysplazją prawej komory wykazują liczne jądra mięśnia sercowego z apoptozą. (Panele B i D, × 100; Panele C i E, × 400).
Tabela 1. Tabela 1. Zakres obszarów apoptozy i procent apoptycznych jąder sercowych w tych obszarach w sekcjach prawego miokardium komorowego od pacjentów z arytmogenną prawokomorową dysplazją komórkową. Rycina 3. Rycina 3. Jądra apoptotyczne w nie-miocytach w reakcji zapalnej u jednego pacjenta (barwienie immunonadtlenowe za pomocą barwienia hematoksyliną × 250). Oznaczanie końca skończonego DNA in situ za pomocą TdT i biotynylowanego dUTP nie wykazało apoptozy w odcinkach mięśnia sercowego prawej komory od czterech normalnych dorosłych osobników (Figura 2A). Przeciwnie, odcinki mięśnia sercowego prawej komory od sześciu z ośmiu pacjentów z arytmogenną dysplazją prawej komory wykazały liczne komórki z genomowymi fragmentami DNA w ich jądrach (Figura 2B, Figura 2C, Figura 2D i Figura 2E). Większość tych komórek łatwo rozpoznawano jako komórki miokardium pod mikroskopem świetlnym przy dużym powiększeniu, ponieważ były one dobrze ukształtowane, wydłużone i prążkowane (Figura 2C i Figura 2E). Apoptotyczne komórki mięśnia sercowego często znajdowały się w obszarach mięśnia sercowego, które nie zostały jeszcze zajęte przez adipocyty i zwłóknienie. Rzadziej występowały w regionach zastąpionych tkanką tłuszczową i włóknistą, w których wciąż obecne były rzadkie kardiomiocyty nieapoptotyczne. Zarówno zakres regionów z komórkami apoptotycznymi, jak i procent apoptotycznych komórek miokardialnych w tych regionach był różny u różnych pacjentów (Tabela 1). Reakcje zapalne wykryto na skrawkach od jednego z ośmiu pacjentów (Pacjent 1). Ten pacjent miał najwyższy procent apoptotycznych komórek mięśnia sercowego, a niektóre komórki zapalne również były apoptotyczne (Tabela i Figura 3).
Ryc. 4. Ryc. 4. Przekroje prawidłowego miokardium komorowego u pacjentów z arytmogenną dysplazją komórkową prawej komory (hematoksylina i eozyna). W panelu A znajdują się marginesowe masy chromatyny w jądrach mięśnia sercowego w przekroju podłużnym (strzałki) (× 250). W panelu B znajduje się wiele okrągłych, hiperdencyjnych fragmentów jądrowych, których wygląd jest zgodny z wyglądem ciał apoptotycznych, w przekroju poprzecznym (strzałka) (× 400).
Wykrywanie komórek apoptotycznych przez znakowanie końcowe fragmentacji DNA in situ zostało potwierdzone przez fakt, że również patologiczne kryteria apoptozy zostały spełnione.
[podobne: bromazepam, flexagen, klimakterium ]
[patrz też: neuralgia międzyżebrowa, osad moczu bakterie, osteofitoza trzonów kręgowych ]