Dowód apoptozy w arytmogennej dysplazji komór komorowych czesc 4

Na sąsiednich odcinkach barwionych hematoksyliną i eozyną jądra wielu komórek mięśnia sercowego wykazywały marginesową masę chromatyny wraz z dyskretnymi, dobrze zachowanymi ciałkami apoptotycznymi (Figura 4A i Figura 4B), typowymi patologicznymi cechami apoptozy.14 Brak oznak apoptozy sąsiednie sekcje barwione hematoksyliną i eozyną od czterech normalnych osobników (dane nie przedstawione). Ekspresja CPP-32 w prawym komorowym mięśniu sercowym od pacjentów z arytmogenną dysplazją komórkową prawej komory
Figura 5. Figura 5. Wykrywanie immunohistochemiczne CPP-32. W panelu A prawidłowy mięsień sercowy prawej komory nie barwi dla CPP-32 (x 400). W panelu B mięsień sercowy prawej komory od pacjenta z dysplazją prawej komory barwi intensywnie dla CPP-32 (x 400). Przeciwciało przeciwko CPP-32 wykrywano antygenem IgG skoniugowanym z biotyną i układem awidyna-alkaliczna fosfataza-substrat, w którym komórki dodatnie barwią się na czerwono.
Proteaza CPP-32 jest ważna dla indukcji apoptotycznej śmierci komórek w komórkach ssaków.15 Było niewykrywalne lub ledwo wykrywalne w prawej komorze czterech normalnych osobników (Figura 5A), jak również u dwóch pacjentów bez objawów apoptozy. . Jednak kardiomiocyty z prawej komory sześciu pacjentów z apoptozą wykazały wysoki poziom immunoreaktywnego CPP-32 (Figura 5B). Po przeoczeniu pierwotnego przeciwciała anty-CPP-32 nie wykryto barwienia.
Dyskusja
Zgłaszamy występowanie śmierci komórek apoptotycznych w dysplazji prawej komory. James6 wcześniej sugerował, że apoptoza może być mechanizmem śmierci komórkowej w arytmogennej dysplazji prawej komory.
W niniejszym badaniu apoptozę zidentyfikowano poprzez znakowanie końcowe fragmentowanego DNA in situ za pomocą TdT i biotynylowanego dUTP, powszechnie akceptowanej metody wykrywania procesu apoptotycznego16. Pojawiły się obawy o zdolność takich metod znakowania in situ do rozróżnić martwicę komórek i apoptozę. Jednak w tym badaniu wykrycie pozytywnej reakcji z końcowym znakowaniem in situ było skorelowane z obecnością typowych objawów apoptozy (marginesowe masy chromatyny i dobrze zachowane ciałka apoptotyczne) na odcinkach zabarwionych hematoksyliną i eozyną. brak reakcji zapalnej u większości naszych pacjentów przemawia przeciwko martwicy i apoptozie. Ponadto, nie wykryto żadnego pozytywnego wybarwienia w kardiomiocytach z dopasowanych wiekowo normalnych osobników, których serca były przetwarzane w taki sam sposób jak u naszych pacjentów, a końcowe znakowanie fragmentacją DNA in situ nie zostało wykryte, gdy pominięto enzym TdT.
Aby uzyskać dalsze dowody apoptozy w arytmogennej dysplazji prawej komory i rozszerzyć nasze odkrycia, zbadaliśmy poziom ekspresji proteazy CPP-32, której aktywacja jest szczególnie wymagana do apoptotycznej śmierci komórek w komórkach ssaków.15 Nasze stwierdzenie, że wysokie poziomy CPP- Ekspresja 32 była związana z dodatnim znakowaniem końcowym in situ fragmentowanego DNA, co zapewnia silne dowody apoptotycznej śmierci komórki w arytmogennej dysplazji prawej komory.
Stwierdziliśmy, że liczne komórki w prawej komorze pacjentów z arytmogenną dysplazją prawej komory uległy apoptozie
[hasła pokrewne: cefepim, ambrisentan, bromazepam ]
[hasła pokrewne: osteopenia leczenie, dominik ebebenge, pasta budwigowa ]