Nieprawidłowości kliniczne i genetyczne u pacjentów z ataksją Friedreicha ad

Dziesięciu innych pacjentów z czasem trwania choroby krótszym niż pięć lat zostało również sklasyfikowanych jako mających typową ataksję Friedreicha; wszyscy ci pacjenci nie mieli prostego odruchu prostownika, a dwa z nich miały nienaruszony odruch w kończynach dolnych. Wśród pozostałych 74 pacjentów co najmniej jedno z podstawowych kryteriów nadal pozostawało niezmienione po pięciu latach choroby, ale wszystkie miały postępującą, nieodmienną ataksję móżdżkową, zgodną z autosomalnym recesywnym dziedziczeniem. Dziewięć miało przynajmniej jedno rodzeństwo z typową ataksją Friedreicha. Trzydziestu dwóch pacjentów miało jedno lub więcej dzieci. Osiemdziesiąt jeden ze 114 rodzin z ekspansjami GAA to Francuzi. W 74 z tych rodzin oboje rodzice pochodzili z Francji. W pozostałych siedmiu, drugi rodzic pochodził z Włoch (trzy), Belgii (dwa), Niemiec (jeden) lub Maroka (jeden). Były też rodziny z Réunion (17), Algierii (5), Hiszpanii (3), Włoch (3), Portugalii (2), Maroka (1), Grecji (1) oraz Argentyny i Urugwaju (1).
Analiza powtórzenia GAA
Powtórzenia GAA analizowano metodą Southern blotting. W początkowym raporcie mutację ekspansji wykryto metodą Southern blot DNA strawionego enzymem restrykcyjnym EcoRI.2 W niniejszym badaniu użyliśmy enzymu BsiHKAI, który daje mniejszy docelowy fragment DNA (2,4 kb zamiast 8,2 kb) , pozwalając na dokładniejsze oszacowanie liczby powtórzeń GAA i lepszą rozdzielczość pomiędzy dwoma allelami. Dziesięć mikrogramów genomowego DNA strawiono BsiHKAI (New England Biolabs, Beverly, MA), poddano elektroforezie w 0,9% żelu agarozowym, przeniesiono na błonę HybondN + (Amersham, Little Chalfont, Wielka Brytania) i hybrydyzowano z 32P znakowanym radioaktywnie 463- fragment genomowy bp zawierający ekson 1. Fragment uzyskano w reakcji łańcuchowej polimerazy z przednim primerem CAAGTTCCTCCTGTTTAG i primerem odwrotnym CCGCGGCTGTTCCCGG i sklonowano w pGEM-T. Marker kb-drabiny (GIBCO BRL, Gaithersburg, MD) przeprowadzono i hybrydyzowano równolegle do pomiaru wielkości. Błony przemywano 0,2 x roztworem soli fizjologicznej cytrynianu sodu (1 x solanka cytrynian sodu to 0,15 M chlorek sodu i 0,015 M cytrynian sodu) i 0,1 procent dodecylosiarczanu sodu dwa razy w temperaturze pokojowej i dwa razy w 60 ° C i wystawiono na autoradiografię w -80 ° C z ekranem wzmacniającym.
Analiza statystyczna
Środki porównano z użyciem testów nieparametrycznych i testu t Studenta, a częstotliwości porównano z użyciem testu chi-kwadrat z korelacją chi-kwadrat Yatesa, jeśli było to odpowiednie. Środki podaje się ze standardowymi odchyleniami. Współczynniki regresji z modelem kwadratowym obliczono dla korelacji między liczbą powtórzeń GAA i wiekiem w momencie wystąpienia i czasu trwania choroby, aż do momentu, gdy pacjent ograniczył się do wózka inwalidzkiego.
Wyniki
Częstotliwość i rozmiar rozszerzeń GAA
Tabela 1. Tabela 1. Częstość występowania rozszerzenia GAA u pacjentów z typową i nietypową ataksją Friedreicha. Rozszerzone powtórzenia GAA znaleziono na obu allelach genu frataksiny u 140 pacjentów ze 114 rodzin (Tabela 1). Dziewięciu pacjentów z sześciu rodzin było heterozygotycznych pod względem mutacji ekspansyjnej i byli znanymi lub oczekiwanymi nosicielami mutacji punktowej na innym allelu, jak wcześniej pokazano w pięciu rodzinach. 2 Wśród pacjentów, którzy spełnili kryteria Hardinga dotyczące ataksji Friedreicha, 3 94 procent było homozygotami dla ekspansji GAA, a pozostałe 6 procent było heterozygotyczne
[hasła pokrewne: anastrozol, cefepim, anakinra ]
[patrz też: neuralgia międzyżebrowa leczenie, psychopraca, odleżyny na piętach ]