Oczyszczanie i charakteryzowanie obfitego białka cytozolowego z ludzkich neutrofili, które sprzyja agregacji zależnych od Ca2 (+) granulek specyficznych.

Wewnątrzkomórkowe zjonizowane wapno jest silnie zaangażowane w pośredniczenie w kilku reakcjach ludzkich neutrofilów na stymulację. Jednak białka, które służą jako efektory tych odpowiedzi, nie zostały dobrze scharakteryzowane. Aby zidentyfikować białka, które mogą służyć jako mediatory wpływu Ca2 + w ludzkich neutrofilach, wyizolowaliśmy białka wiążące się z fosfolipidami błony w sposób zależny od Ca2 (+). Najbardziej obfite z nich białko o masie 33 kD było łatwo oczyszczane do homogenności i stwierdzono, że wiąże się z pęcherzykami fosfatydyloseryny w obecności 2 mikroM zjonizowanego Ca2 +. Dodatkowo, to oczyszczone białko sprzyjało zależnej od Ca2 (+) agregacji izolowanych swoistych granulek z ludzkich neutrofili, co wskazuje, że może pośredniczyć w kontaktach membrana-błona podczas procesów takich jak fuzja z lizosomem fuzji lub degranulacja. Continue reading „Oczyszczanie i charakteryzowanie obfitego białka cytozolowego z ludzkich neutrofili, które sprzyja agregacji zależnych od Ca2 (+) granulek specyficznych.”

Warianty makrofagowo-zwrotne inicjują zakażenie ludzkim wirusem niedoboru odporności typu 1 po transmisji płciowej, pozajelitowej i pionowej.

W fazie bezobjawowej dominują powracające makrofagi, niesyncytujące warianty HIV-1 i mogą być przyczyną powstania zakażenia u osobnika narażonego na mieszaninę wariantów HIV-1. W tym przypadku badano charakterystyki genotypowe i fenotypowe populacji wirusów obecnych w parach seksualnych, pozajelitowych lub wertykalnych dawców-biorców. Analiza sekwencji domeny V3 potwierdziła obecność homogennej populacji wirusa u niedawno zakażonych osobników. Biologiczne klony HIV-1 dodatkowo scharakteryzowano pod względem zdolności indukowania syncytium na linii komórkowej MT2 i tropizmu makrofagów, jak zdefiniowano przez pojawienie się prowirusowego DNA po inokulacji makrofagów pochodzących z monocytów. Zarówno przypadki transmisji seksualnej, jak i pozajelitowej ujawniły selektywny wzrost u biorcy wariantu (-ów) najbardziej makrofagowego (-ych) obecnego (-ych) w dawcy. Continue reading „Warianty makrofagowo-zwrotne inicjują zakażenie ludzkim wirusem niedoboru odporności typu 1 po transmisji płciowej, pozajelitowej i pionowej.”

Synteza tkanki łącznej indukowana ciśnieniem w segmentach tętnic płucnych jest zależna od nienaruszonego śródbłonka.

Fizjologiczne bodźce akumulacji tkanki łącznej w remodelingu naczyń płucnych są słabo określone. Postulowaliśmy, że zwiększone ciśnienie w tętnicach płucnych jest bodźcem do syntezy tkanki łącznej, a odpowiedź zależy od nienaruszonego śródbłonka. Napięcie mechaniczne równoważne ciśnieniu 50 mmHg stosowano przez 4 godziny w izolowanych głównych tętnicach płucnych szczurów (śródbłonek nietknięty lub usunięty) i włączaniu [14C] proliny do kolagenu, waliny [14C] w elastynę, [3H] tymidyny w DNA i pro. Poziomy mRNA kolagenu (I) zostały zmierzone. W nienaruszonych naczyniach, indukowana napięciem synteza kolagenu (3,1 +/- 0,4 vs. Continue reading „Synteza tkanki łącznej indukowana ciśnieniem w segmentach tętnic płucnych jest zależna od nienaruszonego śródbłonka.”

Wpływ odwrócenia przepływu krwi w autotransplantacji wątroby w miejscu regeneracji hepatocytów

Badaliśmy rolę kierunku przepływu krwi w wątrobie w miejscu lokalizacji hepatocytów w regenerującej się wątrobie. Pojedyncze płaty wątroby u psa zostały poddane automatycznej transplantacji do okolic szyi, przy czym dopływ krwi został przywrócony w taki sposób, aby perfundować płat wątrobowy od przewodu w portalu do żyły centralnej lub, w odwrotnym kierunku, od żyły centralnej do przewodu wiencowego. Częściowa resekcja niedransplantowanej wątroby została później przeprowadzona w celu wywołania regeneracji w przeszczepach za pomocą środków humoralnych. Podano trytowaną tymidynę, a radioautografy przygotowano z wyciętej przeszczepionej i nieransplantowanej wątroby. W. Continue reading „Wpływ odwrócenia przepływu krwi w autotransplantacji wątroby w miejscu regeneracji hepatocytów”

Pochodzenie biliproteiny ssaczej i przegrupowanie glukuronidu bilirubiny in vivo u szczurów.

W chorobie wątrobowo-żółciowej bilirubina staje się związana kowalencyjnie z albuminą surowicy, tworząc nieodłączny kompleks pigment-białko żółci (biliproteina). Aby wyjaśnić mechanizm powstawania biliprotein, zbadaliśmy skład pigmentu żółciowego krwi od zwierząt z cholestazą doświadczalną i przeprowadziliśmy badania porównawcze tempa tworzenia biliprotein in vivo i in vitro podczas inkubacji glukuronidów bilirubiny z albuminą. Podwiązanie dróg żółciowych u szczurów i świnek morskich doprowadziło do szybkiej akumulacji w krążeniu bilirubiny, heterogenicznych bilirubinowych estrów kwasu glukuronowego i biliproteiny, które migrowały wraz z albuminą na wysokosprawnej chromatografii cieczowej. Po usunięciu przeszkody biliproteina pozostała w krążeniu dłużej niż inne gatunki pigmentów żółciowych. Biliproteiny i heterogoniczne estry bilirubiny kwasu glukuronowego nie były tworzone u homozygotycznych szczurów Gunn z podwiązaniem dróg żółciowych, ale powstały, gdy glukuronidy bilirubiny inkubowano z surowicą szczurzą Sprague-Dawley lub albuminą surowicy ludzkiej w 37 ° C in vitro. Continue reading „Pochodzenie biliproteiny ssaczej i przegrupowanie glukuronidu bilirubiny in vivo u szczurów.”