Ekstrakcja RNA i PCR w czasie rzeczywistym

width=300Przygotowano lizaty białka z kontrolnych i zmutowanych jąder (myszy) lub z limfocytów krwi obwodowej (PBL) (człowieka). Całkowitą zawartość białka oznaczono metodą Bradforda. Każdą próbkę poddano SDS-PAGE a membranę poddano immunoblottingu za pomocą króliczego przeciwciała XRCC2 (GeneTex, GTX16397) w rozcieńczeniu 1: 1000. Wtórne przeciwciało IgG-HRP (1: 2000, Santa Cruz Biotechnology) i zestaw do chemiluminescencji ECL (GE Healthcare) zastosowano do wizualizacji sygnału.

Całkowity RNA ekstrahowano z tkanek testowych (myszy) lub z PBL (człowieka) przy użyciu zestawu RNAiso Plus (TaKaRa, Dalian, Chiny). cDNA zsyntetyzowano z 1 ug RNA przy użyciu zestawu do syntezy cDNA pierwszej nici PrimeScript II (TaKaRa, Dalian, Chiny). Reakcje PCR przeprowadzono na systemie PCR 7500 w czasie rzeczywistym (Applied Biosystems) przy użyciu NovoStart SYBR qPCR SuperMix (Novoprotein, Shanghai, China). Startery wykorzystano w doświadczeniach qPCR: XRCC2-5UTR-F i XRCC2-3UTR-R. Każde oznaczenie zostało zduplikowane cztery razy. Dane analizowano za pomocą niesparowanych dwustronnych testów t przy użyciu oprogramowania R.

Porównanie leczenia trombolitycznego z pierwotną angioplastyką wieńcową w ostrym zawale mięśnia sercowego ad 7

Charakterystyka pacjentów i wyniki leczenia w trakcie hospitalizacji w randomizowanych, kontrolowanych badaniach porównujących pierwotną angioplastykę z terapią trombolityczną. Od pierwszych prób leczenia trombolitycznego w leczeniu ostrego zawału mięśnia sercowego badacze spekulowali, że szybka reperfuzja całkowicie zamkniętej tętnicy wieńcowej poprawiłaby wynik. Sugeruje się, że zastosowanie pierwotnej angioplastyki rozszerza lub zwiększa tę korzyść, ponieważ arterii można otwierać bardziej wiarygodnie za pomocą angioplastyki niż w przypadku leczenia trombolitycznego.6,7 Randomizowane, kontrolowane badania porównujące pierwotną angioplastykę z terapią trombolityczną wykazały ogólnie poprawę – wyniki leczenia u pacjentów leczonych pierwotną angioplastyką (Tabela 3) .1-3 Jednak w badaniach tych brakuje danych na temat odległego wyniku, a wyniki nie zostały potwierdzone w większych, wieloośrodkowych badaniach klinicznych. W niniejszym badaniu wykorzystano dane obserwacyjne dotyczące ponad 3000 pacjentów z ostrym zawałem mięśnia sercowego, aby ocenić, czy wyniki tych randomizowanych badań można powtórzyć w środowisku społeczności. Chociaż pacjenci nie zostali losowo przydzieleni do leczenia, nie było istotnych różnic pod względem demograficznych lub klinicznych cech charakterystycznych dla linii podstawowej między pacjentami z grupy leczenia trombolitycznego a grupą z pierwotną angioplastyką. Continue reading „Porównanie leczenia trombolitycznego z pierwotną angioplastyką wieńcową w ostrym zawale mięśnia sercowego ad 7”

Różnice w poziomie zaawansowania akademickiego – wyniki krajowego badania pediatrów ad 5

Intensywistki i kardiolodzy obu płci zgłaszali znacznie wyższe zarobki niż specjaliści lub inni specjaliści. W przypadku respondentów płci męskiej i żeńskiej więcej czasu spędzonego na opiece nad pacjentami niż na badaniach, więcej godzin pracy, odpowiednie instytucjonalne wsparcie badań i wyższe ogólne zadowolenie z kariery wiązały się z wyższymi rocznymi wynagrodzeniami. Tylko dla członków wydziału płci męskiej więcej problemów związanych z karierą i frustracją wiązało się również z wyższymi zarobkami. Różnice między płciami wśród najbardziej produktywnych respondentów
Podzieliliśmy próbkę na trzy równe grupy na podstawie wydajności akademickiej. W najbardziej produktywnej grupie występowały podobieństwa między członkami wydziału płci męskiej i żeńskiej oraz znaczne różnice między nimi a ich mniej produktywnymi kolegami. Continue reading „Różnice w poziomie zaawansowania akademickiego – wyniki krajowego badania pediatrów ad 5”

Przeszczepienie płuc na limfangioleiomiomatozę cd

Pięć wczesnych zgonów (w ciągu jednego miesiąca) było spowodowanych ostrym uszkodzeniem płuc (trzech pacjentów), krwotokiem (jeden pacjent) i rozejściem zespolenia oskrzeli z posocznicą (jeden pacjent). Jedenaścioro pacjentów zmarło 2 do 43 miesięcy po przeszczepieniu z powodu zakażeń (ośmiu pacjentów), zarostowych zapalenia oskrzelików (dwóch pacjentów) i przerzutowego nefroblastoma przenoszonego przez allograft płucny20 (jeden pacjent). Czterech z ośmiu pacjentów, którzy zmarli na infekcję, wcześniej otrzymało zwiększoną immunosupresję w przypadku zarostowego zapalenia oskrzelików (terapia ta polegała na powtarzaniu impulsów steroidowych, globulinach antymitocytowych lub przeciwciałach monoklonalnych anty-CD3 oraz zwiększeniu schematu podtrzymywania immunosupresji, który był połączeniem prednizonu azatiopryna i cyklosporyna). Wymuszona objętość wydechowa w ciągu jednej sekundy (FEV1) wynosiła 48 . 16 procent przewidywanej wartości 6 miesięcy po operacji (zakres, 24 procent do 105 procent, zgłoszono u 23 z 25 osób, które przeżyły) i 49 . Continue reading „Przeszczepienie płuc na limfangioleiomiomatozę cd”

Przeszczepienie płuc na limfangioleiomiomatozę czesc 4

Pierwszy udany przeszczep limfatycznej drożdżycy – połączony przeszczep serca i płuca – przeprowadzono w 1983 r.12,17 Przeszczepienie pojedynczego płuca przeprowadzono w 1988 r. U jednego z pacjentów objętych badaniem.13,14 Naszym celem było wykorzystanie danych zebranych z różnych ośrodków, aby zidentyfikować aspekty choroby, które mogą potencjalnie wpłynąć na wynik przeszczepu płuc. Dlatego należy rozważyć ograniczenia retrospektywnego, wieloośrodkowego badania. Zbiory danych mogą być niekompletne, a wiarygodność uzyskanych informacji zależy od dokładności wspomnień uczestników. Średni przedział 11 lat między wystąpieniem objawów a czasem przeszczepienia płuc jest zgodny z historią naturalną limfangioleiomiomatozy, przy 10-letnich wskaźnikach przeżycia wynoszącej 23,6 40,4 i 78 procent.5 Kitaichi et al. Continue reading „Przeszczepienie płuc na limfangioleiomiomatozę czesc 4”

Wpływ preparatów ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej na mięsaka Kaposiego związanego z AIDS ad 5

Po obserwacji nie obserwowano żadnej zmiany u tego pacjenta. Wśród pozostałych pięciu pacjentów, wszystkie 10 uszkodzeń leczonych hCG miało odpowiedzi, z martwicą i tworzeniem strupów. Cztery z pięciu leczonych rozcieńczeniem uszkodzeń u tych pacjentów całkowicie spłaszczyły się, ale nie wykazały martwicy tkanek. Biopsje pięciu leczonych rozcieńczeniem uszkodzeń nie ujawniły żadnego dowodu na mięsaka Kaposiego w czterech z pięciu. Biopsje zmian leczonych hCG, po jednym u każdego z pięciu badanych pacjentów, nie wykazały obecności mięsaka Kaposiego. Continue reading „Wpływ preparatów ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej na mięsaka Kaposiego związanego z AIDS ad 5”

Wpływ preparatów ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej na mięsaka Kaposiego związanego z AIDS ad 5

Po obserwacji nie obserwowano żadnej zmiany u tego pacjenta. Wśród pozostałych pięciu pacjentów, wszystkie 10 uszkodzeń leczonych hCG miało odpowiedzi, z martwicą i tworzeniem strupów. Cztery z pięciu leczonych rozcieńczeniem uszkodzeń u tych pacjentów całkowicie spłaszczyły się, ale nie wykazały martwicy tkanek. Biopsje pięciu leczonych rozcieńczeniem uszkodzeń nie ujawniły żadnego dowodu na mięsaka Kaposiego w czterech z pięciu. Biopsje zmian leczonych hCG, po jednym u każdego z pięciu badanych pacjentów, nie wykazały obecności mięsaka Kaposiego. Continue reading „Wpływ preparatów ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej na mięsaka Kaposiego związanego z AIDS ad 5”

Wartość diagnostyczna dysmorficznych czerwonych krwinek

Fotomikrografy Dr Saada z dysmorficznych erytrocytów w moczu (obrazy w medycynie klinicznej, wydanie z 30 maja), choć piękne, są niebezpiecznie mylące. Komórki dysmorficzne nie reprezentują krwawienia kłębuszkowego, jak sugeruje legenda. Mogą być wytwarzane w wyniku biopsji nerki2 i dlatego niekoniecznie pochodzą z kłębuszków nerkowych. Można również oczekiwać, że nowotwory nerek będą powodowały krwiomocz krwiaki. Zakładając, że odkrycie dysmorficznych krwinek czerwonych wyklucza wszystkie przyczyny krwiomocz, inne niż kłębuszkowe zapalenie nerek, można pominąć guz nerki. Continue reading „Wartość diagnostyczna dysmorficznych czerwonych krwinek”

Nowotwory pediatryczne: morfologia i biologia

Autorzy wiedzą, że znalezienie tytułu nigdy nie jest najłatwiejszą częścią ich pracy. Techniczne traktaty mogą wydawać się wolne od tej trudności, ale można sobie wyobrazić, że autorzy i redaktor Neoplazji Pediatrycznej zmagają się z różnymi sposobami, aby przekazać rzeczywisty zakres ich wysiłków, zanim wymyślą podtytuł Morfologia i biologia . to dwukierunkowy nacisk tego podręcznika. Terapia jest tylko przypadkowo określana jako okazja, która tego wymaga, a systematyczne badanie diagnostyczne pacjentów jest równie obojętnym problemem. Ale diagnoza morfologiczna, która pomimo proliferacji i rosnącego wyrafinowania innych podejść pozostaje niczym innym niż złotym standardem w diagnostyce onkologicznej, jest wyjaśniona w sposób przejrzysty, wszechstronny i rozsądnie skierowana na najnowsze odkrycia naukowe. Continue reading „Nowotwory pediatryczne: morfologia i biologia”

Nieprawidłowości kliniczne i genetyczne u pacjentów z ataksją Friedreicha ad 6

Wielkość mniejszej ekspansji GAA jest silnie skorelowana z wiekiem i początkiem progresji choroby. Liczba powtórzeń allelu z mniejszą ekspansją stanowi około 50 procent zmienności wieku na początku, w porównaniu z mniej niż 20 procentami dla allelu o większej ekspansji. Poszczególne warianty są jednak duże, a ponad 30 procent wariancji wynika z nieznanych czynników, więc wartość predykcyjna rozmiaru rozszerzenia jest ograniczona. Autosomalne recesywne dziedziczenie sugeruje, że mutacja powoduje utratę funkcji. Ten pogląd jest poparty obserwacją znacznie obniżonych poziomów transkryptu frataksyny w limfoblastach od pacjentów2 oraz faktem, że u niektórych pacjentów heterozygotycznych pod względem ekspansji, drugi allel przenosi mutacje, które powodują wyraźną utratę funkcji przez zakłócanie dojrzewanie lub translacja matrycowego RNA (mRNA) frataksyny. Continue reading „Nieprawidłowości kliniczne i genetyczne u pacjentów z ataksją Friedreicha ad 6”